Kodėl Southern blotinge naudojama nitroceliuliozės membrana?
Kodėl Southern blotinge naudojama nitroceliuliozės membrana?

Video: Kodėl Southern blotinge naudojama nitroceliuliozės membrana?

Video: Kodėl Southern blotinge naudojama nitroceliuliozės membrana?
Video: Quick Tips: Considerations for Selecting Nitrocellulose or PVDF to use for Western Blots 2024, Lapkritis
Anonim

Originaliame protokole nitroceliuliozės membrana buvo naudojamas už blotingas tuo atveju Southern blot bet pastaruoju metu nailonas membranos buvo įgyvendintos blotingas procesas dėl jų gebėjimo efektyviai surišti didesnį kiekį DNR, o tai leidžia Southern blot atlikti su mažesniu kiekiu

Atitinkamai, kodėl nitroceliuliozės membrana naudojama blotuojant?

Nitroceliuliozės membranos yra populiari matrica naudojamas baltymuose blotingas dėl didelio baltymų surišimo afiniteto, suderinamumo su įvairiais aptikimo metodais (chemiliuminescencija, chromogenine ir fluorescencija) ir gebėjimo imobilizuoti baltymus, glikoproteinus ar nukleino rūgštis.

Be to, kodėl DNR perkeliama į nailono membraną? Naudojant 0,4 M NaOH kaip perkėlimas tirpiklis po trumpo išankstinio gelio apdorojimo rūgštimi, DNR metu yra depurinuojamas perkėlimas . Turėti kontaktą DNR gelyje arba po jo perkėlimas į nailono membrana , sumažina jo gebėjimą hibridizuotis.

Be to, koks yra Southern bloting tikslas?

A Southern blot yra metodas, naudojamas molekulinėje biologijoje aptikti specifinę DNR seką DNR mėginiuose. Southern bloting sujungia elektroforezės būdu atskirtų DNR fragmentų perkėlimą į filtro membraną ir vėlesnį fragmentų aptikimą zondo hibridizacija.

Kaip Southern blotting padeda teismo medicinos studijoms?

A Southern blot , pavadintas jo išradėjo Edvino vardu Pietų , yra metodas, naudojamas patikrinti, ar DNR mėginyje nėra konkrečios DNR sekos. Kai individo DNR virškinama specifiniu restrikcijos fermentu, gauti fragmentai analizuojami pagal Southern blot analizė.

Rekomenduojamas: