Kaip sužinoti DNR koncentraciją pagal absorbciją?
Kaip sužinoti DNR koncentraciją pagal absorbciją?
Anonim

DNR koncentracija yra apskaičiuojamas išmatuojant absorbcija esant 260 nm, reguliuojant A260 drumstumo matavimas (matuojamas pagal absorbcija esant 320 nm), padauginus iš praskiedimo koeficiento ir naudojant ryšį, kad A260 1,0 = 50 µg/ml grynos dsDNR.

Taip pat žmonės klausia, kaip rasti DNR koncentraciją?

Norėdami nustatyti DNR koncentraciją pradiniame mėginyje, atlikite šiuos skaičiavimus:

  1. dsDNR koncentracija = 50 μg/mL × OD260 × praskiedimo koeficientas.
  2. dsDNR koncentracija = 50 μg/mL × 0,65 × 50.
  3. dsDNR koncentracija = 1,63 mg/ml.

Be to, kas yra gera DNR koncentracija? A Gerai kokybės DNR pavyzdyje turi būti A260/A280 santykis 1,7-2,0 ir A260/A230 santykis yra didesnis nei 1,5, bet kadangi skirtingų metodų jautrumas šiems teršalams skiriasi, šios vertės turėtų būti laikomos tik jūsų mėginio grynumo gairėmis.

Ar tokiu būdu DNR sugeria esant 280 nm?

Absorbcijos santykis esant 260 nm prieš 280 nm yra dažniausiai naudojamas vertinti DNR baltymų tirpalų užteršimas, nes baltymai (ypač aromatinės aminorūgštys) sugerti šviesa ties 280 nm.

Kaip naudojate NanoDrop DNR koncentracijai?

Iš esmės nanolašas suteikia galimybę pasirinkti DNR, RNR, baltymai. Reikia pasirinkti DNR, tada įpilkite 2 ΜL vandens (mili Q pageidautina), pasirinkite „Blank“ir įpilkite dar 2 ΜL vandens, kad patvirtintumėte, jog matas yra 0. Tada įdėkite 2 ΜL savo mėginio. Gausite išmatavimus.

Populiarus pagal temą