Kodėl spektrofotometras turi būti nustatytas tam tikrame bangos ilgyje?
Kodėl spektrofotometras turi būti nustatytas tam tikrame bangos ilgyje?

Video: Kodėl spektrofotometras turi būti nustatytas tam tikrame bangos ilgyje?

Video: Kodėl spektrofotometras turi būti nustatytas tam tikrame bangos ilgyje?
Video: Spectrophotometer: Wavelengths 2024, Lapkritis
Anonim

Kai sureguliuosite bangos ilgis ant spektrofotometras , tu yra keičiant prizmės ar difrakcinės gardelės padėtį taip, kad skirtinga bangos ilgiai šviesos yra nukreiptas į plyšį. Kuo mažesnis plyšio plotis, tuo geresnis instrumento gebėjimas atskirti įvairius junginius.

Taigi, kokiam bangos ilgiui bus nustatytas spektrofotometras?

Priklausomai nuo šviesos šaltinio bangos ilgio diapazono, jį galima suskirstyti į du skirtingus tipus: UV matomas spektrofotometras: naudoja šviesą ultravioletiniame diapazone (185–400 nm) ir matomą diapazoną (400–400 nm). 700 nm ) elektromagnetinės spinduliuotės spektro.

Taip pat kodėl jums reikia kalibruoti spektrometrą kiekvieną kartą, kai keičiate bangos ilgį? Spektrofotometras turi būti sukalibruotas prieš tuščią tirpalą taip kad matavimai po to, kai galima naudoti tuščiojo tirpalo absorbciją kaip nulinę atskaitą. Medžiagos gebėjimo sugerti šviesą matas bangos ilgis.

prie kokio bangos ilgio reikia imti rodmenis?

Imk skaitymai 5 nm intervalais šiek tiek prieš ir po to bangos ilgis . Pavyzdžiui, jei didžiausia absorbcija buvo nustatyta ties 450 nm, tada norint gauti tikslesnį skaitymas λmax, imkite absorbciją skaitymai esant 440, 445, 455 ir 460 nm.

Kodėl matuojate tirpalo absorbciją esant 550 nm?

Šarminėje aplinkoje baltymai reaguoja su vario jonais sprendimas sudaryti violetinės spalvos kompleksą, kuris sugeria šviesą ties 550 nm . Todėl iki matavimo komplekso koncentracija, naudojant A550 ( Absorbcija adresu 550 nm ), tu taip pat yra matavimo baltymų koncentracija.

Rekomenduojamas: