Ar yra kitų būdų, kaip išvalyti PGR produktus?
Ar yra kitų būdų, kaip išvalyti PGR produktus?

Video: Ar yra kitų būdų, kaip išvalyti PGR produktus?

Video: Ar yra kitų būdų, kaip išvalyti PGR produktus?
Video: Kas gali nutikti sutrikus pagrindinei virškinimo sistemos liaukai arba kasai? 2024, Lapkritis
Anonim

Toms programoms, kurioms reikia PGR valymas arba patvirtinimas PGR rezultatai, ten yra du metodus paprastai laikomasi: PGR produktas izoliacija naudojant kolonėlę ir gelį valymas iš agarozės gelio.

Kokio tipo chromatografija naudojama PGR produktams išvalyti?

PGR produktams išgryninti naudojama dydžio išskyrimo chromatografija. Tai sulaiko mažas molekules, tokias kaip baltymai, gruntai , ir nukleotidų, o didelės molekulės, tokios kaip PGR produktai, yra per didelės, kad patektų į granules ir patektų per kolonėlę į surinkimo mėgintuvėlius.

Be to, kaip jūs išvalote DNR? Iš esmės jūs galite išvalyti tavo DNR paimkite mėginius lizuodami jūsų ląstelių ir (arba) audinių mėginius taikant tinkamiausią procedūrą (mechaninį ardymą, cheminį apdorojimą arba fermentinį skaidymą), išskirdami nukleino rūgštis nuo teršalų ir nusodindami jas į tinkamą buferinį tirpalą.

Be to, kodėl mes valome PGR produktą?

Valymas DNR iš a PGR reakcija paprastai reikalinga tolesniam naudojimui ir palengvina fermentų, nukleotidų, pradmenų ir buferio komponentų pašalinimą. Dažniausiai naudojami metodai naudoja sukimo kolonėles, kuriose yra silicio dioksido matrica, prie kurios DNR gali būti selektyviai prijungta, esant chaotropinėms druskoms.

Kodėl reikia išvalyti DNR?

Mes švarus aukštyn DNR iš vandeninių tirpalų pašalinti buferines druskas, fermentus ar kitas medžiagas, kurios gali turėti įtakos tolesniam naudojimui. Pavyzdžiui, PGR reakcija švarus aukštyn, švarus iki po apribojimo virškina ir švarus genomo ar plazmidės DNR užterštos ląstelių baltymais / šiukšlėmis.

Rekomenduojamas: